brv病毒治疗方法

该病毒科最先是1984年,由Horzinek和Weiss提出的,命名为花托状病毒科(Toroviridae),是由"Tortes"一词引伸来的,有圆环,花托等含意。表示病毒核衣壳尤如弯曲而成的一个开着的花托,其粒子的形状像是一个“炸面圈”。该病毒科有两个代表种:一是马伯尔尼病毒(Berne Virus)(BEV),是1972年,在瑞士的伯尔尼,从一匹患有假膜肠炎和粟粒性肉芽肿的马中分离出来的;另一种是牛布雷达病毒(BredaVirus)(BRV),是1982年Woode等人,在美国,衣阿华州的布雷达,从腹泻的小牛中分离出来的。 (一)病毒的感染谱 BEV的P138/72株已适应于马真皮(E.dcm)和马胎儿皮肤(EMS),并且该病毒能引起致细胞病变作用(CPE)。BRV迄今为止,还不能适应于细胞培养,只能在牛体内传代。有证据表明该科病毒在有蹄动物,兔形动物,啮齿类动物以及人中都有存在。

根据牛轮状病毒(Bovine rotavirus,BRV)的NSP4基因序列,设计并构建了shRNA重组慢病毒载体RNAi-H1-89,利用脂质体介导法,将RNAi-H1-89与辅助质粒共转染293细胞,包装shRNA重组慢病毒;重组慢病毒感染MA104细胞24h后继续接种BRV,以针对LacZ基因的shRNA重组慢病毒为对照,48h后与LacZshR-NA对照比较,RNAi-H1-89明显抑制MA104细胞病变;RT-PCR检测结果表明,针对NSP4基因的shRNA可特异性抑制牛轮状病毒NSP4基因表达;病毒滴度测定表明,在转染50%、75%、95%RNAi-H1-89质粒的细胞培养上清液中,病毒滴度分别是对照组的50%、20%和10%。上述实验结果表明,针对NSP4基因的shRNA能高效地沉默NSP4基因,并且能阻断牛轮状病毒增殖。

在生长成单层的MA104细胞中加入抗BRV受体McAb,及用抗-BRV中和后的抗BRV受体McAb,37℃作用1小时,再感染BRV。结果表明抗BRV受体McAb既能保护MA104细胞不受BRV的感染,又能代替BRV和抗-BRV发生抗原抗体的特异性结合反应。同时表明我室建立的筛选杂交瘤细胞的ELISA法的可靠性。

应用抗牛轮状病毒受体单抗 ,探讨牛轮状病毒 (BRV)、人轮状病毒 (HRV)受体蛋白的相似性。为进一步研究受体性状、作用提供基础资料。方法　使用抗BRV R McAb进行ELISA、免疫斑点、细胞保护试验、固相分析及组织细胞的免疫组化染色。结果　发现抗BRV R McAb能和抗BRV IgG、抗HRV IgG结合 ,体外能特异性地阻断BRV、HRV攻击MA10 4细胞。提纯的BRV受体在体外能结合BRV、HRV。免疫组化试验证实 :在胎儿小肠粘膜、气管粘膜、MA10 4细胞膜表面有轮状病毒受体存在。结论　位于组织细胞膜表面的BRV、HRV受体能被 2种病毒识别 ,为同源性相近的蛋白 下载App查看全文 下载全文 更多同类文献

研究ＭＡ１０４细胞上的牛轮状病毒（ＢＲＶ）受体。方法ＢＲＶ受体的单克隆抗体（单抗）与溴化氰活化的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ偶联，利用免疫亲和层析法从ＭＡ１０４细胞膜制备物中提纯了ＢＲＶ受体。结果间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）及免疫斑点法表明提纯物呈ＢＲＶ受体抗原阳性；ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单抗偶联柱层析洗脱物仅有单一区带与洗脱峰对应；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ表明提纯物能够免被受体单抗识别；固相分析实验表明纯化物具有结合ＢＲＶ的能力；提纯物的小鼠免疫血清可以阻断ＢＲＶ感染宿主细胞。结论纯化物为ＢＲＶ受体

利用新生牛小肠粘膜细胞为抗原,免疫纯系 Balb/C 鼠。获得鼠抗牛小肠粘膜细胞血清。用提纯的抗 BRV-IgG,建立 ELISA 方法,用以检测以上抗血清。结果表明,抗血清中含有抗 BRV 受体抗体,这种抗体可以在体外模拟 BRV 和兔抗 BRV-IgC 发生特异性结合。该方法可用于抗 BRV 受体单克隆抗体的筛选。

根据牛轮状病毒(Bovine rotavrius,BRV)的群特异性基因VP6设计了1对特异引物,建立并优化了能够快速检测BRV的二温式PCR方法。特异性和敏感性试验结果表明,该二温式PCR只对BRV敏感,可扩增获得大小为385 bp的特异性条带,其敏感性为最低能检测到1 pg的BRV RNA;而对其他病毒不敏感。说明所建立的BRV二温式PCR方法是一种快速、特异、敏感的检测方法。

对我国不同来源的狂犬病野毒株８２０２、ＢＲＶ、ＭＲＶ以及无毒疫苗株ＳＲＶ９的Ｇ基因４０５～１１４４位核苷酸序列进行了ＲＴ－ＰＣＲ扩增、克隆和序列测定，并应用计算机对其进行了分析比较。结果证明，鹿源８２０２株与中国人用疫苗株为同源株（同源性达９７．０％），因此我国鹿狂犬病极可能是人用疫苗毒株污染所致；同地不同动物分离的ＭＲＶ株和ＢＲＶ株为亲缘关系较远毒株，表明ＢＲＶ引起的牛狂犬病不是由于ＭＲＶ感染所致；疫苗株ＳＲＶ９与３个野毒株同源性在８３％～８４％之间。３个野毒株８２０２、ＢＲＶ、ＭＲＶ及疫苗株ＳＲＶ９的糖基化位点和抗原决定簇内某些氨基酸亦不同。由计算机建立的系统树首次证明我国存在着狂犬病病毒基因亚型。８２０２、ＭＲＶ、ＳＲＶ９和其他对照株的同源性在８５．３％以上，为Ⅰａ亚型；ＢＲＶ与它们的同源性仅为８２．３％，被分为Ⅰｂ亚型。从而证明我国存在亲缘关系较远的狂犬病野毒株

用差速离心法纯化的牛轮状病毒(BRV)分别免疫鼠和兔,制备了鼠抗BRV和兔抗BRV超免疫血清,并用层析方法进行了纯化,建立了检测BRV的双抗体夹心ELISA方法。该双抗体夹心ELISA的最佳反应条件为:兔抗BRV IgG包被浓度为10μg.mL-1,鼠抗BRV IgG工作浓度为5μg.mL-1,样品反应时间60 min,酶标抗体工作浓度为1∶5 000,以OD450 nm≥0.432作为阳性判定标准。该方法的板间、板内重复性变异系数小于10%,最低检测浓度为1.41μg.mL-1,并与牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛冠状病毒(BCV)和牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)等病原无交叉反应。用建立的ELISA方法与BRV RT-PCR方法同时检测40份临床粪便样品,符合率达到95%。结果表明,建立的双抗体夹心ELISA方法具有较好的特异性和较高的敏感性,可用于BRV的快速检测。

对比研究胃癌、胰腺癌患者术后血液高凝状态的发生 ,发展及其相应的临床监测和有效的临床干预。方法　胃癌、胰腺癌患者各 3 0例 ,随机分为 4组 ;胃癌、胰腺癌患者各设对照组和低分子肝素 (LMWH )组 ,每组 15例。两个LMWH组术后第 1天开始预防性应用LMWH 5 0 0 0U /d× 7d。各组均于术前、术后 2周分别测定血液流变学指标及观察血凝状态。结果　 60例胃癌、胰腺癌患者术前全血还原黏度 (BRV )低切、高切偏高 ,胃癌与胰腺癌差异无显著性 (P 0 .0 5 )。术后胃癌对照组BRV低切 (2 0 .3 2± 5 .42 )mPa·s ,高切 (7.96± 3 .16)mPa·s ,1例出现静脉血栓 ,占 3 .3 % ;LMWH组BRV低切 (11.42± 5 .0 3 )mPa·s ,高切 (3 .96± 3 .0 7)mPa·s ,两组间差异有显著性 (P 0 .0 5 )。术后胰癌对照组BRV低切 (2 1.82± 6.17)mPa·s ,高切 (8.62± 3 .48)mPa·s ,2例出现静脉血栓 ,占 6.7% ,胰癌LMWH组BRV低切 (13 .11± 5 .17)mPa·s ,高切 (4 .96± 3 .61)mPa·s ,两组间存在统计学差异(P 0 .0 5 )。胃癌LMWH组、胰腺癌LMWH组无 1例有出血等副作用。结论　胃癌、胰腺癌患者术后血液处于高凝状态 ,BRV明显升高 ,静脉血栓发生率较高 ,胰腺癌较胃癌表现更明显。术后及时进行LMWH的干预 ,可缓和血液高凝状态.

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